Rozpuszczanie Orexin-A

Właściwości proszkowe Freeze- Suszony Orexin-A

Orexin-A jest dostarczany w postaci liofilizowanego białego proszku, stabilnego w temperaturze pokojowej, jeśli jest on suchy i chroniony przed światłem. Sproszkowany Freeze- formuła pozwala na długi okres trwałości (1-2 lat temperatury pokojowej, bezterminowo chłodzony) i eliminuje zawartość wody. Po rozpuszczeniu, stabilność ulega znacznemu zmniejszeniu; roztwór po rozpuszczeniu należy zużyć w ciągu 2 - 4 tygodni.

Wybór rozpuszczalnika do rozpuszczania

Dwie opcje: Sterylny chlorek sodu (0,9% roztwór do wstrzykiwań, zwany także normalnym roztworem soli fizjologicznej) jest standardowy i stabilny długookresowy. Bakteriostatyczna woda (jałowa woda z 0,9% środkiem konserwującym alkohol benzylowy) ma zwiększone właściwości przeciwbakteryjne dla fiolek wielodawkowych przechowywanych w 2 - 4 tygodniu. Można je przyjąć; chlorek sodu jest częstszy i nieco bardziej stabilny.

Obliczanie objętości roztworu

Określić żądane stężenie. Standard: 1-2 mg / mL. Jeśli stosuje się 5 fiolek mg, należy dodać 5 rozcieńczalników mL dla 1 fiolki mg / mL lub 2, 5 fiolki mL dla 2 fiolki mg / mL. Przykład: 10 fiolek mg = 10 rozcieńczalników mL dla 1 fiolki mg / mL. Bardziej skoncentrowane roztwory (2-3 mg / mL) wymagają mniejszych objętości wstrzyknięć (łatwiejsze do częstego stosowania); mniejsze stężenia (0,5 mg / mL) są łatwiejsze do dokładnego pomiaru, ale wymagają większych objętości.

Technika rozpuszczania Etap-by- Krok

1) Przygotować sterylną przestrzeń roboczą (wytrzeć blatem 70% alkoholu). 2) Góra fiolki Swab z 70% przygotowaniem alkoholu, niech wyschnie 30 sekund. 3) Wprowadzić rozcieńczalnik do jałowej strzykawki (ilość obliczona powyżej). 4) Otop fiolki z igłą, powoli i systematycznie wstrzykiwać rozcieńczalnik o ściankę fiolki (nie bezpośrednio do proszku - minimalizuje pienienie). 5) Wyjąć strzykawkę, delikatnie obracając fiolkę 30- 60 sekund do momentu całkowitego rozpuszczenia proszku (NIE wstrząsać energicznie).

Objawy właściwego rozpuszczania leku

Roztwór powinien być przezroczysty, bezbarwny lub bardzo lekko żółtawy (nie mętny, nie odbarwiony). W przypadku zmętnienia lub odbarwienia nie należy stosować (denaturacja białka). Delikatne wirowanie powinno rozpuścić proszek w ciągu 1-2 minut; jeśli proszek pozostanie po 5 minutach, należy wyrzucić (nieudany rozpuszczenie, możliwe zanieczyszczenie). Kontrola wzrokowa jest niezbędna.

Sterylna technika i zapobieganie zanieczyszczeniu

Stosować sterylną technikę w całym: jałowej fiolce (zamkniętej po otrzymaniu), sterylnej strzykawce / igły, sterylnego rozcieńczalnika, czystych rąk, wymazanych powierzchni. Nigdy nie dotykać końcówki igły ani otwarcia fiolki. Do każdego dostępu do fiolki należy użyć nowej jałowej igły. W przypadku rozpuszczenia w celu wielokrotnego użycia, należy stosować jałową nasadkę strzykawki pomiędzy pobraniem leku. Środki ostrożności zapobiegają zanieczyszczeniu bakteryjnemu i degradacji roztworu.

Przechowywanie odtworzonego Orexin-A

Przygotowany roztwór schłodzić w temperaturze 2- 8 ° C (standardowa temperatura w lodówce) w ciemności. Światło powoduje degradację peptydu; należy używać nieprzezroczystego pojemnika lub przechowywać w oryginalnej, ciemnej fiolce. NIE zamrażać (zamrażanie denatur peptydów, powoduje opady atmosferyczne i sprawia, że roztwór nie jest żywotny). Lek Orexin-A jest stabilny po 2 - 4 tygodniach w zależności od rozcieńczalnika (woda bakteriostatyczna wynosi 3 - 4 tygodnie; normalny roztwór soli fizjologicznej ~ 2 tygodnie).

Postępowanie w fiolce wielodawkowej

W przypadku rekonstytucji w przypadku wielokrotnych dawek (stosowanie raz w tygodniu / przez wiele tygodni) należy stosować wodę bakteriostatyczną i przechowywać w lodówce w ciemności. Fiolka na etykiecie z datą przygotowania roztworu. Dokładna sterylna technika przy każdym pobraniu jest krytyczna: należy użyć nowej igły do każdego losowania, wymazać przegrodę z alkoholem przed każdym wejściem, nie narażać przegrody. Wyrzucić po 3- 4 tygodniach, nawet jeśli pozostaje roztwór.

Rozpuszczanie dawki pojedynczej

Do natychmiastowego podania pojedynczej dawki każdy rozcieńczalnik jest dopuszczalny. Przygotować, wstrzyknąć natychmiast (lub w ciągu kilku godzin), a następnie wyrzucić. To minimalizuje ryzyko zanieczyszczenia i eliminuje obawy o przechowywanie. Wielu użytkowników preferuje przygotowywanie pojedynczej dawki na dobę / tydzień w przypadku fiolek wielodawkowych.

Problemy z rekonstytucją

Chmury / wytrącony roztwór: wyrzucić (denaturowane białko). Proszek nie rozpuści się: sprawdzić, czy rozcieńczalnik jest sterylny i w temperaturze pokojowej; jeśli nadal nie rozpuści, wyrzucić. Nadmierne pienienie: wstrzykiwać wolniej lub pozostawić pianę na 30 minut przed użyciem. Odbarwienie: natychmiast wyrzucić (zanieczyszczenie bakteryjne lub utlenianie).

Porównanie Shelf- Life: Proszek vs. Odtworzony

Proszek suszony na zimno: 1-2 lat temperatura pokojowa, bezterminowo schłodzony (pod warunkiem, że przechowywany jest suchy / ciemny). Przygotowany roztwór: 2 - 4 tygodnie w lodówce, NIE zamrażać. Różnica ta oznacza odtworzenie tylko tego, co będzie używane w ciągu 2-4 tygodni jest rozsądne; duże masowe odpady materiałowe.

Zapewnianie jakości i czystość

Zakup wyłącznie od renomowanych dostawców z badaniem stron trzecich (certyfikaty czystości HPLC). Jakość rekonstytucji zależy od czystości proszku; jeśli proszek jest już zdegradowany / skażony, rekonstytucji nie pomoże. Weryfikacja dostawcy dostarcza danych o czystości (zazwyczaj 95% + minimum czystości). Niskie koszty dostawców często mają słabą kontrolę jakości; kupić od ustalonych dystrybutorów peptydów.

Trusted Research-Grade Sources

Below are the two vendors we recommend for research peptides — both publish independent third-party Certificates of Analysis (COAs) and ship internationally. Affiliate links: we earn a small commission at no extra cost to you (see Affiliate Disclosure).